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2023-05-03 02:01:54

  这个帖子发布于 18 年零 13 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。

  请教一下,怎么用明胶处理24孔板啊?文献上要用明胶处理过的板子,同学告诉我买的一次性的板子不用处理直接用就行,一般都处理过的,想问下是不是这样的啊?另外要处理的话怎么灭菌呢?

  我的方法和楼上的不一样,因为我订的明胶上写明要求2-8度保存,这样的明胶能高压灭菌吗?会不会变性啊?也许楼上用的和我的不一样

  G1393 20ml Lot:44K23881 RMB:大概三百多块钱。

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  2。使用时根据需要取若干ml,我一般取2ml,无菌条件下用去离子水或PBS(我习惯用水)稀释成0.1%的工作液,同样贮存于4度。开云 开云体育

  3。包被时用吸管吸取少许,涂步24孔,原则上,只要孔的所有部位都被明胶浸湿过就可以。开云 开云体育例如,你可以吸取0.5ml左右明胶加到一个孔中,吹吸液体,使液体完全接触孔的所有 部位,然后将培养板倾斜,将明胶全部吸出,再同法依次包被其他孔。包被后于超净台上放置30-40min ,使用前打开盖,在超净台上吹干(此步也可省略,但是我为了能看到包被效果,都花几分钟吹一下),包被效果可以在显微镜下直接观看,包被好的话可以看到整齐排列的结晶。并不是明胶越多越好,只要挂上一薄层就行,因此尽量把孔中的明胶吸净4。用过的 明胶可以回收,但是包被效果稍差。我一般都扔掉,因为20ml2%的明胶足够用了 。

  刚刚看到楼主发的帖子,我看到的细胞培养的一般都是0.1%的明胶,有的用0.2%,但是没见过1.5%,你再确定一下,这样浓度的明胶如果包被板子也可以,只不过太浪费了吧,没有必要。而且包被完之后明胶实际上是在板底形成一层很厚的模,如果细胞消化传代的话,培养液里就会出现悬浮的透明的薄膜,感觉很脏。

  1.5%当然很粘,我用的2%的明胶液体在室温下成半固体状态,吸的时候也不太好吸。不过只要的动作慢一点,应该没问题。

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  把明胶加入PBS,配成0.1%的明胶PBS。然后装入可高压灭菌的玻璃瓶中高压灭菌30分钟。然后在24孔板中加入配好灭菌的0.1%明胶PBS(可盖住24孔板即可),4度放置3小时(或过夜),铺细胞时把明胶PBS吸出来,然后把细胞铺进去就行了。加明胶的目的是帮助细胞贴壁。有的细胞不用加明胶也可以。

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  如果加入明胶的目的就是为了让细胞贴壁生长的话,完全没有必要花费这些多时间和费用来做,到市场到买回来几块TC处理过的细胞培养板就可以了!COSMO品牌现在已在北京合资了,价格下降很多!现在特价一块只要8.00元

  我看到有的书上用1.5%的明胶,那样是不是很粘,不好吸出来啊?另外,明胶不是多肽蛋白类的吗,能高压灭菌吗,我有点不明白了

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