几种常用的明胶胶结剂 这种现象与张居正的性质有关。明胶蛋白分子由3条多肽单链组成，形成三维螺旋状的空间结构。明胶加热溶解时，上述螺旋状体系能量增高，分子向卷曲状结构转变，形成具有一定黏度的溶液。因此明胶能否溶解与其螺旋-卷曲转变密切相关。作者曾探讨了环境和处方因素对软胶囊崩解迟缓的影响。本研究以甲醛开云 开云体育处理明胶胶片模拟不同交联程度，考察了明胶平衡溶胀量(Seq)、蛋白质溶出量及氨基酸残基含量之间的相关性，以及附加剂对明胶中氨基酸残基含量的影响，对引起软胶囊崩解迟缓的可能机理进行探讨。 1 药物、试剂和试药 752型UV光栅分光光度计(上海分析仪器总厂)；ZRS-SG型智能溶出实验仪(天津大学无线电厂)。 明胶(青海明胶股份有限公司)；聚乙二醇(PEG 400，中国医药集团上海化学试剂公司)；Folin-酚试液(北京欣经科生物技术公司)；5%三硝基苯磺酸(TNBS)溶液、牛血清白蛋白(纯度98%)(Sigma公司)；37.32%甲醛溶液(上海化学试剂研究所)。 2 方法和结果 2.1 胶片的干燥、浸泡 取明胶15g在水30ml中溶胀，50℃恒温减压脱气，至溶液澄清透明无气泡，趁热制胶片(2cm×1.5cm×1mm)。将所得胶片置25℃、相对湿度(RH)75%的干燥器中平衡72h(胶片含水量约40%)。取出，室温下干燥至含水量为10%，于RH 25%干燥器中室温保存备用。 取胶片6片，精密Kaiyun 开云称重，分别置系列浓度的甲醛溶液200ml中浸泡15min，取出擦干，精密称重。处理后的胶片于RH 25%干燥器中室温保存。 2.2 胶片擦干试验 取未用甲醛处理的胶片及处理胶片各6片，分别标号，精密称重，置20℃水500ml中溶胀，分别于1、2、2.5、3、3.5和4h取出胶片擦干，精密称重，按文献计算Seq，结果见表1。 2.3 测定蛋白质含量folin-苯酚法 2.3.1 牛血清folin-酚、标准蛋白、酸度的配制 Folin-酚甲液：取碳酸钠1g溶于0.1mol/L氢氧化钠溶液50ml中。另取硫酸铜0.5g溶于1%酒石酸钠溶液100ml中，取1ml与上述溶液混合得到。1d内使用有效。 Folin-酚乙液：取浓度为2.6mol/L的Folin-酚试剂稀释至1mol/L，避光保存。 标准蛋白溶液：取一开云 开云体育定量牛血清白蛋白，用0.1mol/L氢氧化钠溶液溶解，加水配成250μg/ml的溶液。 样品溶液：精密称取明胶0.04g，加热水少量溶解后，用水稀释至1000ml，得40μg/ml的明胶溶液。 2.3.2 folKaiyun 开云in-酚乙液的制备 取Folin-酚甲液5ml置试管中，共6份，分别精密加入标准蛋白溶液0.1、0.2、0.4、0.6、0.8和1ml，加水定容至6ml，混匀，室温放置10min。精密加入Folin-酚乙液5ml，立即摇匀，放置30min。同法制备不含标准蛋白溶液的对照管，于500nm处测定吸收度(A500)，以A500对标准蛋白溶液浓度(C)线性回归，得标准曲线.3～23μg/ml内与吸收度线 n选取标准 取样品溶液1ml按“2.3.2”项下方法操作，测定吸收度，计算得明胶中蛋白质的平均含量为43.56%(n=10)。 取明胶胶片，以水900ml为介质，在37℃、100r/min下进行溶出试验，于30min时取样，过滤，取续滤液5ml照“2.3.2”项下方法操作，以前述所得平均含量换算出对应的明胶溶出量，计算蛋白质溶出量(D)，D=处理明胶胶片溶出量/明胶胶片溶出量×100%，结果见表1。 2.4 乙醇萃取l 将甲醛处理的明胶胶片粉碎，称取粉末11mg浸入4%碳酸氢钠溶液-0.5%TNBS溶液(1∶1)2ml中，40℃保温4h，加入6mol/L盐酸3ml，于120℃、1.1kPa下加热1h，加水5ml稀释，用萃取3次(10、10、8ml)。分取水相5ml，置水浴(37℃)中加热15min，冷至室温，加水15ml后以空白溶液(制备时须在加入TNBS溶液前加入盐酸，其余步骤同)为对照，于346nm处测定吸收度(A346)，按ε-氨基酸残基含量(Y)=m×AKaiyun 开云346计算，其中m为公式简化常数，在光通路为1cm、样品重量为11mg时取值为1.83×10-4。结果见表1。 2.5 氨基酸残基含量 由表1可见，随甲醛浓度的增大，明胶的平衡溶胀量、溶出量和氨基酸残基含量均明显下降。分别以Seq、D和Y对甲醛浓度线;D与Seq、D与Y和Y与Seq之间呈线性关系，且相关性良好(r0.96)。 2.6 明胶的氨基酸残留基 按“2.1”项下制备含不同附加剂的明胶胶片，在40℃、RH 75%下放置3个月，测定其中氨开云 开云体育基酸残基的含量，结果见表2。 表2所列为软胶囊中常用的增塑剂和抗氧剂及其常用浓度。结果显示，加入这些附加剂的明胶胶片放置3个月后，氨基酸残基含量有不同程度的下降，按降幅由小到大排列依次为焦亚硫酸钠、甘氨酸、丙二醇和山梨醇。后二者与空白明胶相比有显著性差异，且浓度较高时氨基酸残基含量更低；焦亚硫酸钠和甘氨酸浓度较高时，氨基酸残基含量与空白明胶较接近。 3 明胶交联反应的程度 3.1 软胶囊崩解迟缓主要是由囊壳材料——明胶发生交联反应所致。明胶分子中氨基酸(主要是赖氨酸和精氨酸)所含的侧链基团在发生氧化或自氧化反应时形成醛基，促发交联反应，阻碍水分子进入明胶内部，使软胶囊难以溶解，溶出时间明显延长。因此明胶的溶出度、平衡溶胀量和内容物含醛量可作为明胶交联反应的指标，而定量测定明胶中氨基酸残基的含量可从分子水映明胶交联反应的程度。 由于交联反应与醛类物质有关，本研究采用甲醛处理模拟明胶交联反应，检验3种指标在反映交联程度中的变化规律，发现三者之间呈良好的线性关系,具有相似的实验规律。 3.2 1分子甲醛可与2分子赖氨酸上的ε-氨基酸残基发生交联反应，因此可在明胶分子内部形成巨大的网状架桥结构，使明胶分子量显著增加，水溶性大大下降。由表1可见，氨基酸残基含量低时，明胶胶片的平衡溶胀量及溶出量也相应较低。 3.3 软胶囊中加入附加剂一方面可保证囊壳成形和稳定，另一方面也能影响明胶的交联。丙二醇和山梨醇是常用的增塑剂，试验表明高温、高湿可显著降低明胶中氨基酸残基含量。原因是这些增塑剂易被氧化成一些低分子醛类，从而增加明胶的交联程度。增大用量，此现象更明显。焦亚硫酸钠和甘氨酸等常用抗氧剂则能吸收明胶和辅料中的过氧化物，阻止由过氧化物使高分子降解引起的明胶交联。

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